VHH抗体(VHH antibody)、または単一ドメイン抗体(Single domain antibody)としても知られ、そのサイズ、溶解性、固有の安定性、および多能構築体に容易に適合させる能力など、従来の抗体フォーマットとは異なる独自の特性を持っています。これらは、一般的でないまたは隠れたエピトープを認識し、酵素ターゲットの空洞や活性部位に効果的に結合する能力を持っています。
VHHは、アルパカ、ラマ、ラクダなどのラクダ科動物から発見された重鎖のみからなる抗体から派生した最小の抗原結合断片です。これは、彼らの小さなサイズと構造によるもので、これにより従来の抗体では難しいかもしれない組織に浸透し、特定のターゲットに高い親和性で結合する能力があります。
Biointronは、単一ドメイン抗体の発見分野でトップクラスの存在として確立されています。ファージディスプレイ技術を活用し、私たちの科学者チームはユーニックな単一ドメイン抗体の製造と開発に専念します。
Data source: 615 VHH antibodies (as part of our developed VHHs)
VHH抗体の親和性が10-8から10-11Mの範囲で生成されていますが、ほとんどは10-8および10-9 Mの範囲にあります。提示されたデータは、1つのクライアントからのプロジェクトの一部を表しており、サンプリングバイアスがある可能性があります。異なるターゲット間の分散を反映していないかもしれない親和性の異なるヒットの分布です。データはSPR親和性測定から得られています。
VHH antibodies have been utilized in a wide variety of settings, such as clinical therapeutics and immunodiagnostics, as well as environmental monitoring, due to their differentiated characteristics. For example, Caplacizumab is an antitumor therapeutics for blood disorders, while CAR-T therapy benefits from VHH-based CAR constructs to enhance treatment precision.
| ステップ | 詳細 | 作業時間 | 納品 |
|---|---|---|---|
| ① 抗原の準備／抗原の検証 |
|
抗原準備には2週間、検証には2〜3日 |
|
| ② アルパカの免疫化とPBMCの単離/保存 |
|
8-10週間 |
|
| ③ VHHファージライブラリの構築 |
|
3-4週間 |
|
| ④ ライブラリーバイオパニング及びスクリーニング |
|
3-4週間 |
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| VHH-Fc抗体の産生 |
|
2週間 |
|
| アフィニティランキング（オプション） | Biacore 8Kにより、アフィニティを測定 | 0.5週間 |
抗原準備には2週間、検証には2〜3日
8-10週間
3-4週間
3-4週間
2週間
0.5週間
Biacore 8Kにより、アフィニティを測定
Biointron’s proven process has achieved substantial outcomes.
After panning and screening, 53 unique sequences were obtained & expressed in the HTP CHO expression system.
Validation of VHHs Binding to X (by ELISA)
49 of 53 VHH Antibodies bound to X (ELISA)
Validation of VHHs affinity with X (by SPR)
48 of 53 VHH Antibodies bound to X (SPR)
Validation of Cell-based VHHs Binding to X (FACS)
43 of 53 VHH Antibodies Bound against CHO-Kl/X Cell
VHHs Agonist Activity Validation
31 of 53 antibodies showed significant agonist activity
VHHs Validation (Blocking assay)
18 of 53 antibodies showed significant blocking activity.
Alpacas were immunized with Claudin 18.2-encoding DNAs, followed by immunizations with Claudin 18.2-overexpressing cells. Alpaca serum taken after immunization manifested specific binding to Claudin 18.2-overexpressing cells (but not to parental ones).
| Antigen | Immunization |
|---|---|
| DNA encoding Target A | 1&2 |
| CHO-K1-Target A | 3, 4, 5 |
| Cell panning | Input (CFU/ml) | Output | Output/Input |
|---|---|---|---|
| 1 | 2.00E+12 | 9.00E+07 | 4.50E-05 |
| 2 | 1.33E+12 | 2.10E+08 | 2.10E+08 |
| 3 | 2.10E+08 | 2.10E+08 | 2.10E+08 |
| Total clone | OD450 (293T-Target A) >0.5 |
OD450 (293T-blank) >0.1 |
Combined with Target A clone number |
Targeted Clone % |
Unique | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 0635-Human Target A | 88 | 2 | 0 | 2 | 2.27% | 1 |
| 0635-Human Target A | 88 | 18 | 12 | 6 | 6.82% | 2 |
| 0635-Human Target A | 88 | 55 | 41 | 14 | 15.91% | 10 |
Four VHHs obtained specifically bound to human Claudin 18.2, but not to Claudin 18.1.
Biointron has delivered over 100 VHH antibody discovery projects annually, leveraging a self-owned alpaca breeding farm with over 300 alpacas. Each project utilizes a dedicated alpaca, ensuring high diversity and large-capacity libraries with sizes of at least 10⁹.
The timeline varies based on project complexity and specific requirements. Generally, the process includes antigen preparation, animal immunization, library generation, screening, and validation, which can span several months.
Yes, Biointron can work with antigens provided by clients or assist in antigen expression as part of the discovery process.
Biointron employs multiple assays for validation, including ELISA, SPR, FACS, internalization studies, and ADCC assays, ensuring the functionality and specificity of the discovered antibodies.
Utilizing state-of-the-art phage display technology and tailored biopanning methods, Biointron generates VHH hits with affinities ranging from 10⁻⁸ to 10⁻¹¹ M. This approach maximizes the likelihood of obtaining high-affinity antibodies.
Clients receive detailed reports, including sequence information, binding affinity data, functional assay results, and purified VHH antibody samples for further testing.
Yes, Biointron offers services such as affinity maturation, humanization, and large-scale antibody production to support the development of VHH antibodies for therapeutic and diagnostic applications.
All intellectual property rights for antibodies discovered under client-specific projects are fully transferred to the client, ensuring complete ownership.
To start, contact Biointron through the website’s inquiry form or email. A consultation will be arranged to discuss project requirements and provide a tailored proposal.
ScientistとScience Exchangeとのご利用可能です。
