VHH抗体(VHH antibody)、または単一ドメイン抗体(Single domain antibody)としても知られ、そのサイズ、溶解性、固有の安定性、および多能構築体に容易に適合させる能力など、従来の抗体フォーマットとは異なる独自の特性を持っています。これらは、一般的でないまたは隠れたエピトープを認識し、酵素ターゲットの空洞や活性部位に効果的に結合する能力を持っています。
VHHは、アルパカ、ラマ、ラクダなどのラクダ科動物から発見された重鎖のみからなる抗体から派生した最小の抗原結合断片です。これは、彼らの小さなサイズと構造によるもので、これにより従来の抗体では難しいかもしれない組織に浸透し、特定のターゲットに高い親和性で結合する能力があります。1
Biointronは、単一ドメイン抗体の発見分野でトップクラスの存在として確立されています。ファージディスプレイ技術を活用し、私たちの科学者チームはユーニックな単一ドメイン抗体の製造と開発に専念します。
Data source: 615 VHH antibodies (as part of our developed VHHs)
VHH抗体の親和性が10-8から10-11Mの範囲で生成されていますが、ほとんどは10-8および10-9 Mの範囲にあります。提示されたデータは、1つのクライアントからのプロジェクトの一部を表しており、サンプリングバイアスがある可能性があります。異なるターゲット間の分散を反映していないかもしれない親和性の異なるヒットの分布です。データはSPR親和性測定から得られています。
ステップ | 詳細 | 作業時間 | 納品 |
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① 抗原の準備/抗原の検証 |
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抗原準備には2週間、検証には2〜3日 |
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② アルパカの免疫化とPBMCの単離/保存 |
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8-10週間 |
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③ VHHファージライブラリの構築 |
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3-4週間 |
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④ ライブラリーバイオパニング及びスクリーニング |
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3-4週間 |
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VHH-Fc抗体の産生(オプション) |
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2週間 |
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アフィニティランキング(オプション) | Biacore 8Kにより、アフィニティを測定 | 0.5週間 |
First, we immunized alpacas with DNA-encoding Target A, and then boosted their immune response by Target A-overexpressing cell line. Alpaca serum can specifically bind to Target A-overexpressing cells but not to blank cells.
Phage Library construction from PBMC
Library size is ~1.1x10E10
Insert rate >95%
Antigen | Immunization |
---|---|
DNA encoding Target A | 1&2 |
CHO-K1-Target A | 3, 4, 5 |
Cell panning | Input (CFU/ml) | Output | Output/Input |
---|---|---|---|
1 | 2.00E+12 | 9.00E+07 | 4.50E-05 |
2 | 1.33E+12 | 2.10E+08 | 2.10E+08 |
3 | 2.10E+08 | 2.10E+08 | 2.10E+08 |
Total clone | OD450 (293T-Target A) >0.5 |
OD450 (293T-blank) >0.1 |
Combined with Target A clone number |
Targeted Clone % |
Unique | |
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0635-Human Target A | 88 | 2 | 0 | 2 | 2.27% | 1 |
0635-Human Target A | 88 | 18 | 12 | 6 | 6.82% | 2 |
0635-Human Target A | 88 | 55 | 41 | 14 | 15.91% | 10 |
A VHH antibody is the antigen binding fragment of heavy chain only antibodies. They are derived from the immune system of camelids such as alpacas.
Recombinant antibodies are monoclonal antibodies produced in vitro through synthetic genes and antibody fragments, instead of using hybridomas. They can take several different formats, such as full-length immunoglobulins (Ig), monovalent antibody fragments such as single-chain fragment variable (scFv) and fragment antigen-binding (Fab), and multimeric diabodies (dimeric scFvs) or triabodies (trimeric scFvs).5
There are several ways to isolate VHHs from camelids against a target of interest and to build a library for screening, such as immunized, naïve, and synthetic/semi-synthetic libraries. The most common approach is by immunizing camelids and building a library based on the repertoire of heavy-chain immunoglobulins.6