アフコシル化抗体発現プラットフォーム アフコシル化抗体発現プラットフォーム

アフコシル化抗体発現プラットフォーム

CHOK1-FUT8 Afucosylated Antibody Expression
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サービス概要

アフコシル化抗体の生産のため、CHOK1-Fut8KO発現プラットフォームを新たに立ち上げました。当社のハイスループット・リコンビナント抗体発現プラットフォームと細胞培養技術との組み合わせ、研究および産業上のニーズに合わせてアフコシル化抗体を迅速に生産することができます。アフコシル化は、antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC)を著しく高めることが示されており、有効性を高めることにより標的療法の可能性を広げます。

アフコシル化抗体発現プラットフォーム Overview

高純度と低エンドトキシンレベル

ノックアウトされたFut8細胞株は、アフコシル化抗体の生産に適用されています。 Fut8は、α-1,6フコシルグリコシド結合の形成を触媒する酵素であり、したがって、アスパラギン酸に結合したN-アセチルグルコサミン部位へのフコースの付加を行います。

フコースフリー宿主細胞CHOK1BN-Fut8KOは、抗体の特性評価と機能検証を行った後、工業生産に使用することができます。一般的なCHOK1BN細胞株と比較して、CHOK1BN-Fut8KOによって産生された抗体は、アフコシル化が達成されるだけでなく、発現量と品質の面でも一貫性が保たれます。

アフコシル化抗体発現プラットフォーム Overview

ハイライト

Fut8遺伝子ノックアウト細胞株

  • Fut8遺伝子ノックアウト細胞株を使用します。
  • 宿主細胞株はフコースが除去されていることを保証します。

高収量と高品質

  • 高純度とエンドトキシンレベルの低い抗体を製造します。

カスタムサービス

  • 抗体配列をご提供いただくだけで、抗体発現作業ができます。
  • 素早い出荷・納品

事例研究

Case 1:

afucosylated-case1-1
No. Host cell INN
001 CHOK1BN Rituximab
002 CHOK1BN-Fut8KO

Expression results (SDS-PAGE & analytics SEC-HPLC)

afucosylated-case1-2

001

afucosylated-case1-3

002

Reduced mass analysis

afucosylated-case1-4

The reduced mass matched the theoretical molecular weight of 001, the main N-glycosylation type on the heavy chain was G0, G1, and N-glycosylation type contain fucose.

afucosylated-case1-5

The reduced mass matched the theoretical molecular weight of 002, the main N-glycosylation type on the heavy chain was G0, G1, and no N-glycosylation type contain fucose was found.

PBMC killing assay (Raji)

afucosylated-case1-6

The results showed both antibodies demonstrated target cell killing activity, indicating their strong potential for immune-mediated cytotoxicity.

Case 2:

afucosylated-case2-1

MW: 52/48/23kDa (123kDa)

This case highlights the production of a bispecific antibody using CHOK1BN-Fut8KO cells. After one-step Protein A purification, SDS-PAGE and analytical SEC-HPLC revealed the presence of high molecular weight impurities. A second round of purification was performed to improve purity. Reduced MS analysis confirmed that the antibody was afucosylated, with no N-glycosylation at the Fc region.

afucosylated-case2-2

1st purification

afucosylated-case2-3

2nd purification

afucosylated-case2-4

The reduced mass matched the theoretical molecular weight of the light chain, and there is no N-glycosylation site.

afucosylated-case2-5

The reduced mass matched the theoretical molecular weight of the heavy chain, and no N-glycosylation type contain fucose was found.

“The newest offering in our service catalog, Biointron’s CHOK1-FUT8 afucosylated antibody expression, is an exciting addition to our capabilities. Heavily researched, afucosylation will improve your antibody efficacy, and my seasoned team of scientists will make sure the end results go above and beyond expectations.”
Antibody Production Team
Shiqian Yao
Antibody Production Team

FAQs About Afucosylated Antibody Production

参考資料

afucosylated-bg

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