アフィニティ・マチュレーション アフィニティ・マチュレーション

抗体最適化:アフィニティ・マチュレーション

Antibody Optimization: Affinity Maturation
  • 独自の FCMES-AM™プラットフォーム
  • CDR領域の非バイアス部位飽和変異導入法
  • 少なくとも5倍以上の親和性向上を保証

サービス概要

アフィニティ・マチュレーション(Affinity Maturation)は、まだ親和性成熟といいます。抗体と標的抗原への結合強度を向上させるために使用されます。抗体最適化方法の1つです。 これは、哺乳動物のB細胞における体内でのソマティックハイパーミューテーションとクローン選択によって自然に行われますが、治療目的のために実験室内でのミュータジェネシスと選択によっても行われることがあります。


FCMES-AM™ (Full Coverage Mammalian Expression System for Affinity Maturation) は、Biointronの特許プラットフォームです。CDR領域内の各アミノ酸は、システインとメチオニンを除く17種類のアミノ酸に均等な割合で変異させます。クローンは哺乳類系で発現され、最初のテストとしてELISA結合アッセイが実施されます。これに続いて、さらなる親和性測定のためにSPR (surface plasmon resonance)またはFACS (fluorescence-activated cell sorting) が行われます。


Biointronの専門チームにお気軽にお問い合わせください。私たちのプラットフォームが、より優れた性能のためにあなたの抗体の親和性を向上させる方法を探るお手伝いをいたします。


私たちのプラットフォームにより、抗体の親和性を向上させ、優れた性能の抗体を提供します。お気軽にお問い合わせください。

アフィニティ・マチュレーション Overview

ハイライト

CDR領域の非バイアス部位飽和変異導入法

  • 全てのCDR領域をカバーします。
  • その他の17種類のアミノ酸が同じ頻度で出現します。

高効率スクリーニング

  • 少なくとも5倍以上の親和性向上を保証します。
  • アフィニティ・ランキング ELISA/SPR/FACS

短納期

  • 6-8週間
  • 哺乳類HTP発現系

作業フローチャート

部位特異的飽和変異
部位特異的飽和変異
ハイスループット哺乳類細胞発現
ハイスループット哺乳類細胞発現
ホットスポットを特定するELISAとシークエンシング
ホットスポットを特定するELISAとシークエンシング
コンビナトリアル変異デザイン
コンビナトリアル変異デザイン

アフィニティ・マチュレーションサービスの詳細

ステップ 詳細 納品
配列デザイン
  • CDR領域におけるノーバイアス部位飽和変異誘発(CDR領域の各アミノ酸について17個のアミノ酸変異体すべて)
/
ホット・スポットの特定
  • 哺乳類におけるハイスループット発現システム (FCMES-AM™)
  • ELISA検出
  • ELISA測定結果
ホットスポットの組み合わせ
  • 哺乳類におけるハイスループット発現システム (FCMES-AM™)
  • ELISA検出
  • ELISA検出
抗体発現とアフィニティー検出
  • 抗体発現とアフィニティー精製
  • Biacore Full KDまたはFACSによるアフィニティ確認
  • 精製抗体
  • プラスミド配列
  • アフィニティー検出結果

ケース・スタディ

  • Case 1:

    The parental antibody is VHH, after affinity maturation, off of the VHH improves and the affinity increases 23-fold, 19-fold and 6-fold separately.

    Affinity Maturation Case 1
    Koff of the VHH improves and the affinity increases 6-fold, 23-fold and 19-fold separately.
  • Case 2:

    The parental antibody is mouse IgG, after affinity maturation, the affinity increases 120-fold, 48-fold and 46-fold separately.

    Affinity Maturation Case 2
    Affinity increases 120-fold, 48-fold and 46-fold separately.
“We have our own affinity maturation platform, called FCMES-AM™. I believe this and the research my team is dedicated to developing, is what makes our service the best in the industry. With a guaranteed affinity improvement, you can trust we will get the job done.”
Sufeng Cai
Sufeng Cai
Affinity Maturation Team

FAQs

  • When is affinity maturation needed?

    Affinity maturation is widely used to improve antibody activity through mutagenesis and selection for downstream applications such as therapeutics and diagnostics. This is often necessary to ensure the affinity towards the target and that the therapeutic potential of antibodies is reached. Optimization can also involve adjusting functionality, cross-reactivity, stability, immunogenicity, and any chemical liabilities.1

  • What is the difference between in vivo and in vitro affinity maturation?

    In vivo

    When a host is repeatedly exposed to the same antigen, the antibodies produced by their immune response will have increasingly greater affinity, avidity, and anti-pathogen activity. This occurs due to somatic hypermutation in the variable CDRs (complementarity-determining regions) of immunoglobulin genes in B cells, and takes place in germinal centers (structures within secondary lymphoid tissues). Clonal selection takes place when follicular dendritic cells of the germinal centers present antigens to the B cells, with only the most competitive B cells surviving to stably conjugate with follicular B helper T cells. After several rounds of selection, high-affinity antibodies will be produced.2

    In vitro

    Similar to the in vivo process, in vitro affinity maturation is used to optimize antibodies, antibody fragments, or other peptides by diversifying the antibody base sequence and isolating higher-affinity binders.

  • What is the principle behind affinity maturation?

    Although antibodies can be generated against countless distinct epitopes, your genome does not have the capacity to hold all the information. Thus, B-cells employ somatic hypermutation, which involves mutations of the genes which encode the antigen-binding region in direct response to the antigen stimulus. Through successive generations and exposure, only B cells producing antibodies that recognize the antigen with high affinity will survive.3

Affinity Maturation Project Commitment

Project Commitment

You will have a dedicated project manager for each project when you work with us, guaranteeing efficient planning, clear communication, and a personalized approach with a strong focus on you. We aim to build trust in all our collaborations, with strong relationships with more than 1,500 biotechnology and pharmaceutical companies.

参考文献一覧

  • Chan, T. Y., & Groves, A. T. (2021). Affinity maturation: Highlights in the application of in vitro strategies for the directed evolution of antibodies. Emerging Topics in Life Sciences, 5(5), 601-608. https://doi.org/10.1042/ETLS20200331
  • Doria-Rose, N. A., & Joyce, M. G. (2015). Strategies to guide the antibody affinity maturation process. Current Opinion in Virology, 11, 137. https://doi.org/10.1016/j.coviro.2015.04.002
  • Alberts B, Johnson A, Lewis J, et al. (2002). The Generation of Antibody Diversity. Molecular Biology of the Cell. 4th edition. New York: Garland Science. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK26860/

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